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Unidad de Microscopía

Presentación

El Instituto de Investigación Hospital 12 de Octubre cuenta con el apoyo de la Unidad de Microscopía del Hospital Universitario 12 de Octubre. Esta Unidad está situada en el edificio “Centro de Investigación” del Hospital Universitario 12 de Octubre. Los Responsables de la gestión de la Unidad de Microscopía son el Dr. Fernando Bartolomé, la Dra. Gema Ruiz Hurtado, la  Dra. Carolina Alquézar Burillo y la Dra. Alicia Usategui.

La actividad de los Responsables de esta Unidad se concreta en los siguientes puntos:

  • Definición de las normas generales de uso de los diferentes microscopios con los que cuenta, lo que supone una mejora considerable en el rendimiento y mejor aprovechamiento de los mismos.
  • Control del mantenimiento externo anual de los equipos, necesario para su correcto funcionamiento, así como el contacto con los servicios técnicos cuando es necesario.
  • Asesoramiento a los distintos grupos de investigación en el desarrollo, y puesta a punto de experimentos y protocolos con el equipo.
  • Formación específica (training inicial) para nuevos usuarios.

Cartera de Servicios

La Unidad de Microscopía permite a los investigadores del Instituto i+12 la aplicación de las siguientes técnicas y metodologías:

a. Análisis de imágenes en soporte cristal y en soporte plástico (placas ibidi, multipocillo, etc.)

b. Inmunofluorescencias y detección de sondas (apoptosis y proliferación celular, localizaciones celulares y subcelulares, estudios de difusión…).

c. Localizaciones subcelulares mediante proteínas fluorescentes.

d. Estudios tridimensionales multiposición (Z-Stack, time-lapse, mosaico, etc.).

e. Contratinciones: marcaje del complejo de golgi (lectina HPA, prot. Grasp68), del  retículo endoplasmático (Rianodina, Calnexina), de mitocondrias (Mitotracker Red/Green), de microfilamentos de actina (falotoxina) y marcaje nuclear (IP, Hoechst, DAPI…).

f. Estudios in vivo fisiológicos:

  • Cuantificación del calcio intracelular (Fura2-AM, Fluo3-AM, Fluo4-AM, MagFluo4…).
  • Determinación de potencial de membrana plasmática (di4ANEPS) y mitocondrial (TMRM, TMRE).
  • Determinaciones de estrés oxidativo (DHE, GSH, MitoSox, Lipid peroxidation…).
  • NADH/Redox, FAD/Redox.
  • Colocalización e interacción de proteínas (FRET).

g. Detección de fluorescencia hasta 8 canales (LED8).

h. Imágenes de organoides.

i. Deconvolución de imágenes de fluorescencia.

Instalación e Infraestructuras

Para llevar a cabo estas técnicas y metodologías, la Unidad de Microscopía del Instituto i+12 cuenta con el siguiente equipamiento de alta tecnología:

 

Microscopio Confocal Espectral LSM510 META ConfoCor 3 (ZEISS).

Microscopio THUNDER Imager 3D Cell Culture (Leica)

 

 

Personal y datos de contacto

Responsables Confocal:

Gema Ruiz Hurtado. gemaruiz@h12o.es –  Teléfono: 91 390 80 01

Fernando Bartolomé. fbartolome.imas12@h12o.es – Teléfono: 91 390 87 65

Responsables THUNDER:

Alicia Usategui Corral. ausategui.imas12@h12o.es – Teléfono: 91 390 8766

Carolina Alquézar Burillo. carolinaalquezar.imas12@h12o.es – Teléfono: 91 390 8765

Imágenes

Ejemplos

Actualizado Nov 2022